
峰高和峰面积可以在有效液相色谱仪检测中作为定量的依据。它是相对于近似对称的色谱峰,计算峰高要比计算峰面积优越得多。
峰高和峰面积测量仅是对检测信号的一种响应,该响应需同组分的浓度或质量结合起来方可完成定量方法。无论在相同还是不同的色谱条件下进行试验,均要采取一定的手段加以校正,才可能拥有准确的定量结果。柱成分自身对照法、峰面积归一化、内标法、外标法及标准加入法是有效液相色谱定量分析中常用的校正技术。
不加校正因子的主成分自身对照法是*简单的定量方法,也可以认为是峰面积归一化法的特色形式,其使用前提是假定杂质与主成分的响应因子基本相同。一般情况下,如杂质与主成分的分子结构相似,响应因子将不会有太大差别。峰面积归一化法简便快捷,但因个杂质与主成分响应因子不一定相同、杂质量与主成分量不一定在同一线性范围内、仪器对微量杂质和常量主成分的积分精度及准确度不相同等因素,所以在质量标准中采用有一定的局限性。
已知杂质对主成分的相对响应因子在0.9~1.1范围内时,可以用主成分的自身对照法计算含量,超出0.9~1.1范围时,宜用杂质对照品计算含量,也可用加校正因子的主成分自身对照法。理想的定量方法为已知杂质对照品法与未知杂质不加校正因子的主成分自身对照法两者的结合。研究人员可根据实际情况选用合适的液相色谱仪分析定量方法。
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