
有效液相色谱仪用检测波长测定时一般都选择在对样品有**吸收的波长下进行,以获得**的灵敏度和抗干扰能力。但应特别注意在选择测定波长时,**考虑到所使用的流动相的紫外吸收性质。也就是说,使用紫外-可见光检测器时,溶剂不应吸收测定波长的紫外光,样品测定波长应当在溶剂紫外吸收波长上限以上。噪声降至10-4~10-****U,才能保证检测的灵敏度,才能用于梯度洗脱。
液相色谱仪使用溶剂吸收波长的上限,就是透过波长的下限。波长的下限规定为溶剂在以空气为参比,样品池厚度为1厘米的条件下,恰好产生1.0吸光度时相对应的波长值,即溶剂透过率为10%时的波长。
溶剂中如果含有吸收紫外光的杂质,同样会使检测背景提高,从而灵敏度降低,如果用作梯度洗脱也会引起严重漂移。因此,液相色谱仪洗脱对溶剂纯度要求较高,一般使用分光纯或分析纯溶剂,在有条件时可采用色谱纯溶剂。需要特别注意的是,不能使用化学纯或纯度更低的溶剂,另外,对溶剂进行专门纯化处理也是不错的办法。
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